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百年沧桑
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ELISA实验原理和具体操作目的PPT

ELISA实验原理ELISA是酶联免疫吸附剂测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)的简称,是一种应用最广泛的免疫测定技...
ELISA实验原理ELISA是酶联免疫吸附剂测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)的简称,是一种应用最广泛的免疫测定技术。其基本原理是利用抗原抗体结合的可逆性,通过酶与抗体或抗体的缀合物与抗原的结合,将免疫反应的特异性放大,从而达到对痕量抗原的检测。包被将抗原或抗体包被到固相载体上,使之能与样本中的相应抗原或抗体结合。常用的固相载体包括聚苯乙烯微孔板、硝酸纤维素膜等封闭在包被后的固相载体上引入一种阻断剂,以封闭载体上未被包被的位点,从而避免非特异性结合。常用的阻断剂包括BSA(牛血清白蛋白)、卵清蛋白等洗涤通过洗涤步骤去除未结合的物质,为下一步的加样作准备加样将样本加入到已包被的固相载体中,使样本中的抗原或抗体与固相载体上的相应抗体或抗原结合洗涤去除未结合的物质显色加入酶标记的二抗与结合在固相载体上的抗原或抗体结合,再加入底物显色,根据颜色反应判断结果终止反应加入终止液停止显色反应检测通过酶标仪对颜色进行定量分析,从而得到样本中抗原或抗体的含量ELISA实验具体操作目的ELISA实验的具体操作目的通常包括以下几个方面:定量检测通过标准品和样本的OD值,计算出样本中抗原或抗体的浓度。这种方法常用于生物样品(如血液、尿液、组织等)中某种蛋白质、激素、药物等的定量检测定性检测主要用于检测样本中是否含有某种特定的抗原或抗体。例如,可以用于检测一个人是否感染了某种病毒或细菌抗体效价检测在疫苗研发和生产过程中,需要检测接种者血清中抗体的效价,以评估疫苗的保护效果和免疫应答水平。ELISA可以用于检测血清中抗体的效价药物筛选ELISA可以用于药物筛选实验,以评估药物对靶点的作用效果。例如,可以用于筛选能够抑制某种酶活性的药物基因表达分析通过设计基因特异性探针并包被在固相载体上,ELISA可以用于检测细胞或组织中特定基因的表达水平食品安全检测ELISA可以用于食品安全检测,例如检测食品中是否含有毒素、农药、抗生素等有害物质环境监测ELISA可以用于环境监测,例如检测水体、土壤等环境中是否含有某种有害物质生物标志物分析在疾病诊断、预后判断等方面,ELISA可以用于检测生物样品中与特定疾病相关的生物标志物。例如,可以用于检测血清中肿瘤标志物的含量以辅助肿瘤诊断